核酸混檢是指將多個樣本進行混合后提取核酸進行擴增檢測的方法。為規范應用混檢技術進行新冠病毒篩查，7月21日國務院應對新型冠狀病毒肺炎疫情聯防聯控機制醫療救治組印發了《新冠病毒核酸篩查稀釋混樣檢測技術指引》，對我國新冠疫情常態化防控管理中的核酸混檢提出了指導。下面，請隨小編一起來了解學習該政策。
適用人群
指引明確提出新型冠狀病毒核酸篩查稀釋混樣技術僅適用于大人群樣本的篩查，稀釋混樣檢測結果不作為最終確診依據，在人群總體陽性率較低（低于0.1%）時更為適宜。
不適用于：
1.重點區域人群（近期有疫情發生的小區含確診病例和無癥狀感染者、老舊小區、人口密集小區、流動人口聚集區和近期離省外出人群）、其他不適合稀釋混樣檢測的人群；
2.醫療機構就診患者。
以上表明，核酸混檢有其特定的適用場景，即在廣泛人群篩查時可以起到經濟高效的快速初步篩選作用，為后面縮小目標范圍鎖定陽性樣本，節約試劑和檢測時間。而在新冠感染風險相對較高的重點區域和人群則不宜采取混檢策略，應單獨分檢，以防漏診。
操作流程
在操作流程方面，目前指引注意事項中提到稀釋混樣檢測必須提取核酸，原因在于核酸混檢方法的采樣對核酸濃度具有較大影響，指引方案中指出采樣時將拭子頭浸入含1～3ml病毒保存液中，再將采集的數個樣本（原則上不超過5個）各取200ul進行充分混合，形成混合待檢樣本。核酸提取與檢測過程按有關實驗室常規標準操作流程進行。每一次上樣擴增中，80個加樣孔用于加入混合樣本（如5混1，總計80×5個單樣本）；10個加樣孔用于單樣本（單樣本來自上述80×5個原液的隨機樣本）。
如果常規磁珠法核酸提取試劑盒取200ul樣本進行核酸提取，無法避免降低樣本濃度，5樣本混合后，樣本濃度將稀釋5倍。當混樣檢測，出現低濃度（弱陽性）樣本（1000copies/ml）時，5個樣本混合，該樣本濃度稀釋5倍則變成200copies/ml。
選擇高靈敏度的核酸檢測試劑是確保篩查結果準確性的重要條件。當前獲批的大部分核酸檢測試劑盒靈敏度低于200copies/ml，若采用常規磁珠法核酸提取試劑取200ul樣本提取核酸檢測，則遇到弱陽性樣本（濃度低于1000copies/ml）混樣檢測時，大部分廠家試劑無法檢出，容易造成漏檢。
圣湘生物的核酸提取試劑有磁珠法和快速核酸釋放劑法兩種，靈敏度都達到200copies/ml，完全可以滿足檢測靈敏度要求，目前新研發的磁珠法核酸提取試劑可將靈敏度提升到10copies/ml。根據國家衛健委臨檢中心室間質評EQA報告，在2020年第一次室間質評活動中202010號樣本（128copies/ml）全國僅有6家實驗室檢出，測評用到的新冠核酸檢測試劑品牌，圣湘生物就是其中之一。
市場主流企業新冠核酸檢測試劑（熒光PCR法）性能參數對比
核酸提取方法
核酸提取目前主要采用的方法有磁珠法和快速核酸釋放劑法，二者均在臨床廣泛應用。
1、磁珠法
磁珠法提取核酸是通過對磁珠進行包被（如硅基、氨基、羧基等），從而實現對核酸的高通量、自動化提取。其原理是核酸與磁珠主要依靠靜電作用、疏水作用和氫鍵作用結合，細胞或組織在裂解液作用下釋放其中的核酸，此時經過表面修飾的納米磁珠即與核酸進行特異性結合，形成“核酸-磁珠復合物”。然后在外加磁場的作用下將復合物分離，最后經過洗脫非特異性吸附的雜質、去鹽、純化后，得到欲提取的核酸。
圣湘生物使用的進口納米級磁珠表比面積大，吸附核酸多，磁響應性和穩定性極好；配備的側吸式的磁力架磁場強度高，吸附高效；專利磁珠修飾技術，能夠增強核酸捕獲。創新的裂解配方，裂解能力強，無蛋白酶K，無需加熱，降低了氣溶膠污染風險。自主專利的無機溶液與有機溶液組合洗滌方式，去雜質能力強，一次洗滌，核酸損失少，操作簡便。使用內源性內標監控采樣、提取和擴增全過程，避免了假陰性。
2、快速核酸釋放劑法
快速核酸釋放劑法，使用化學釋放劑或裂解液直接裂解樣本釋放核酸，不需純化，比磁珠法具有更加快速簡便的優勢，整個操作在一個反應管進行，減少操作誤差，提高檢驗結果可重復性。獨特的干擾物螯合封閉機制，分離雜質，純化核酸，避免干擾。核酸免提取可減少物理因素對核酸的降解，保證核酸結構的完整性，核酸無洗滌和損失，提高檢驗結果的靈敏度。
該方法操作簡便，不僅可以應用于臨床疑似患者的確診，也可用于疫情反彈地區多個樣本混合采集后的檢測，結合快速核酸檢測系統，能拓展更多應用場景，有效提高檢測效率，減輕工作人員實驗手工操作壓力，是磁珠法的有力補充手段。圣湘生物的快速核酸釋放劑法具有自主專利配方，檢測靈敏度性能超過普通國產同類產品，完全能夠滿足臨床單檢和混采檢測靈敏度要求。
圣湘生物可提供多種新冠病毒核酸檢測解決方案，基于快速核酸釋放技術和磁珠法技術均可實現不同通量的自動化操作，滿足不同場景、不同人群篩查就診的需求。如大規模人群篩查時，可以將多個標本混采在一管后，采用原始樣本上機的方式，避免因稀釋樣本降低靈敏度而造成的漏檢；醫療機構就診患者、高危區域人群，需要進行快速確診分流時，兩種樣本核酸提取技術都可完美實現不同通量的自動化操作！
質量控制
在質量控制方面，指引對室內質控和室間質評提出了要求。如每批上樣檢測應當在剩余加樣孔中設置1個弱陽性質控樣本和三個陰性質控樣本（2份生理鹽水和1份陰性混合樣本）。實驗室應參加省級及以上臨床檢驗中心組織的室間質量評價（EQA）活動，按照活動要求完成質評物接收、儲存、檢測和回報檢測結果等工作。指引注意事項中也建議對試劑檢測靈敏度進行評估，應選擇靈敏度較高的檢測試劑。
為達到指引的質控要求，建議對目前市場上的各類核酸提取試劑進行混檢模式下的橫向測評，了解不同檢測試劑的靈敏度限值，以便在混檢策略時采用適宜的核酸提取試劑，發揮混檢在大規模篩查中的作用，為早期阻斷疫情傳播提供有力支撐。
